ABSTRACT
Abstract Introduction: Serological tests are used to confirm Trypanosoma cruzi infection and their discriminatory accuracy depends on the established decision threshold. Both, the standard methodology and the receiver operating characteristic (ROC) curve methodology allow obtaining such threshold. Objective: To compare the discriminatory accuracy of the standard methodology and the ROC curve methodology regarding serological tests for confirming T. cruzi infection. Materials and methods: A set of anti-T. cruzi antibodies values from subjects previously classified as healthy or as having Chagas disease were used, and computer simulations were performed under homoscedasticity and heteroscedasticity conditions. Sensitivity, specificity, 100% sensitivity, 100% specificity, and perfect-decision were calculated. Results: The discriminatory accuracy obtained with the standard methodology favored specificity (98.22% to 99.56%) over sensitivity (67.25% to 87.14%), while in the ROC curve methodology a balance between sensitivity (94.56% and 96.44%) and specificity (90.35% and 92.11%) was observed. Also, in the ROC curve methodology a greater perfect-decision ratio was observed, which, under homoscedasticity conditions, was >90%. Decisions thresholds were affected by het-eroscedasticity conditions. Conclusion: The ROC curve methodology showed better discriminatory accuracy, therefore its use for calculating decision thresholds in serological tests for detecting Chagas disease is recommended.
Resumen Introducción. Las pruebas serológicas se utilizan para detectar infección por Trypanosoma cruzi y su precisión discriminatoria depende del umbral de decisión establecido. La metodología estándar y la de curva característica operativa del receptor (COR) permiten obtener tal umbral. Objetivo. Comparar la precisión discriminatoria de la metodología estándar y la metodología de curva COR en lo que respecta a pruebas serológicas para detectar infección por T. cruzi. Materiales y métodos. Se utilizó un conjunto de valores de anticuerpos contra T. cruzi de individuos clasificados como chagásicos o sanos y se realizaron simulaciones computarizadas en condiciones homocedásticas y heterocedásticas. Se calculó sensibilidad, especificidad, sensibilidad = 100%, especificidad = 100% y decisión-perfecta. Resultados. La precisión discriminatoria de la metodología estándar favoreció la especificidad (98.22% a 99.56%) sobre la sensibilidad (67.25% a 87.14%), mientras que la de la curva COR mostró un equilibrio entre sensibilidad (94.56% y 96.44%) y especificidad (90.35% y 92.11%). Esta última metodología también evidenció una mayor proporción de decisión-perfecta, la cual llegó a ser >90% en condiciones de homocedasticidad. Los umbrales de decisión fueron afectados por las condiciones de heterocedasticidad. Conclusión. La metodología de la curva COR mostró una mejor precisión discriminatoria, por lo que se recomienda su uso para el cálculo de umbrales de decisión en pruebas serológicas para la enfermedad de Chagas.
ABSTRACT
La Leishmaniasis es una protozoosis causada por parásitos del género Leishmania. Desde el punto de vista clínico se clasifican en formas cutánea, cutáneo-mucosa y visceral. El diagnóstico clásico de Leishmaniasis está basado en la verificación de amastigotas mediante la observación al microscópico de frotis, tomados por aspirados o biopsia de la lesión y teñidos con coloraciones tipo Romanowsky. En el presente estudio se planteó evaluar la utilidad de diferentes técnicas de coloración citológicas para el diagnóstico parasitológico de Leishmaniasis. Se elaboró un instrumento de medición usado con escala de estimación. Se utilizaron hámster (Mesocricetus auratus) inoculados experimentalmente con un aislado del parásito causante de Leishmaniasis cutánea, mantenidos en el bioterio experimental del Instituto de investigaciones Biomédicas de la Universidad de Carabobo sede Aragua (BIOMED-UC). Se seleccionaron aquellos hámsteres con seis meses hasta un año de inoculación que presentaban la formación de un nódulo en el lugar de inoculación. Se realizaron 60 frotis por aposición de los fragmentos de los nódulos y se clasificaron en tres grupos de 20 láminas cada uno, para colorearlas con 3 técnicas de coloración: Giemsa, Gaffney y Pap-mart®, luego fueron observadas al microscopio óptico con objetivo de 100X por 3 expertos en el diagnóstico de Leishmania y se evaluó cada coloración mediante una lista de cotejo debidamente validada. Los resultados de la investigación permitieron determinar que a pesar de que la tinción de Giemsa es la óptima y adecuada para demostrar las formas amastigotas en los frotis citológicos por observarse las estructuras con mayor nitidez y precisión, la coloración con Pap-Mart también permite hacer el diagnóstico de esta parasitosis, la cual pudiera ser utilizada como una alternativa en el momento que no se cuente con el reactivo de Giemsa en el mercado.
Leishmaniasis is a protozoal infections caused by parasites of the genus Leishmania. Clinicalyis are classified in cutaneous, muco-cutaneous, difuse and visceral forms. The classic diagnosis of leishmaniasis is based on the verification of amastigotes by observing microscopic smears, aspirates or taken by biopsy of the lesion and stained with Romanowsky type stains. In the present study it was proposed to evaluate the usefulness of different staining techniques for cytological diagnosis parasitologicof Leishmaniasis. A measuring instrument used to estimate scale was developed. Hamster (Mesocricetus auratus) experimentally inoculated with an isolate of the parasite that causes cutaneous leishmaniasis, kept in the experimental animal facility of the Institute of Biomedical Research at the University of Carabobo Aragua headquarters (BIOMED-UC) were used. Hamsters were selected those six months to a year inoculation presenting a nodule formation at the site of inoculation. 60 smears were performed by apposition of the fragments nodules were classified into three groups of 20 sheets each, to color with 3 coloring techniques: Giemsa, Gaffney and Pap-Mart®, then were observed under an optical microscope with objective 100X by 3 experts in diagnosing Leishmania, and each color was evaluated by a list of matching properly validated. The research results allowed determining that although Giemsa staining is optimal and adequate to demonstrate the amastigote forms in cytological smears observed structures more clearly and accurately, staining with Pap-Mart also allows the diagnosis of this parasitosis, which could be used as an alternative at the time is not counted with Giemsa reagent on the market.
ABSTRACT
La leishmaniasis visceral (LV) en Latinoamérica y particularmente en Venezuela, es una protozoosis que en las últimas décadas ha mostrado cambios en su patrón epidemiológico inicialmente rural hasta la activación de focos urbanos, significando esto, la emergencia de una problemática de salud pública en zonas marginales de la periferia de grandes ciudades. En el Departamento de Parasitología, de la Universidad de Carabobo, en el año 2005, fue diagnosticado un caso de leishmaniasis visceral humana en un niño de 2 años, residente del Barrio Los Próceres, ubicado en el Municipio Naguanagua, del Estado Carabobo-Venezuela, siendo este el primer caso de LV reportado en esta comunidad. A partir de este hallazgo se planteó realizar un estudio seroepidemiológico en la población humana y canina de esta comunidad el cual permitirá caracterizarlo como un foco urbano de LV. Se aplicó encuesta epidemiológica y se tomó muestra sanguínea a la población humana y canina que habitaba en un área de 200 m. a partir de la residencia del caso diagnosticado; se utilizó la prueba ELISA-rK39, la seroprevalencia obtenida fue de 5,96% (9/151) en humanos y 24,24% (8/33) en caninos. El 55,55% de seropositivos humanos tenían entre 0 - 13 años. No se evidenció asociación entre la seropositividad y variables epidemiológicas evaluadas como: grado de instrucción, ocupación, tiempo de residencia en la localidad, procedencia de otras comunidades y presencia de caninos. La mayoría de los caninos seropositivos tenían más de 2 años de edad y en condición asintomática. Los resultados obtenidos sugieren la presencia de un nuevo foco de LV urbano de reciente data en la localidad evaluada.
Visceral leishmaniasis (VL) in Latin America and particularly in Venezuela, is a protozoan infection that in recent decades has shown changes in the epidemiological pattern, initially rural to activating urban foci, resulting in the emergence of a public health problem in the periphery of large cities. In the Parasitology Department, Carabobo University, in 2005, was diagnosed a case of human visceral leishmaniasis in a 2-year old child, resident of Barrio Los Próceres, located in the Municipality Naguanagua, Carabobo State. This was the first reported case of VL in this community. From this finding we carried out a seroepidemiological study in human and canine population of this community in an attempt to characterize it as an urban focus of VL. An epidemiological survey was conducted and blood samples were taken from the human and canine population living in an area of 200 m. of the index case, in order to detect anti-leishmania antibodies using the ELISA-rK39 test. The seroprevalence obtained for human was 5.96% (9 / 151), and for dogs 24.24% (8 / 33). 55.55% of seropositive humans were between 0-13 years old. No evidence of association between seropositivity and assessed epidemiological variables such as educational level, occupation, length of residence in the town of origin, from other communities and the presence of dogs. Most of the seropositive dogs were over 2 years of age and in an asymptomatic condition. Results suggest the presence of a new recent focus of urban LV of in the studied area.
ABSTRACT
La leishmaniasis visceral (LV) es una protozoosis causada por parásitos del complejo Leishmania donovani, caracterizada clínicamente por síndrome febril prolongado, hepatoesplenomegalia, anemia y pérdida progresiva de peso, que puede ser mortal especialmente en niños si no es diagnosticada precozmente. Entre los métodos serológicos más utilizados para el diagnóstico de LV se encuentran el ensayo inmunoenzimático (ELISA). En la actualidad se caracterizan antígenos que aumentan la especificidad de las pruebas serológicas, esto se ha logrado con la utilización de antígenos recombinantes como el K39 (rK39). Este estudio evaluó el antígeno rK39 mediante ELISA, para el serodiagnóstico de leishmaniasis visceral. Se utilizaron 100 sueros caracterizados positivos para LV, que presentaron al menos tres de los siguientes criterios diagnósticos: clínica, epidemiología, serología y demostración directa del parásito (extendido de médula ósea). Los controles incluyen 100 sueros caracterizados negativos para LV y 30 positivos a otras patologías: tuberculosis (5), tripanosomiasis (5), toxoplasmosis (5), lepra (5), leishmaniasis cutánea (5), malaria (2) y HIV/VIH (3). El rK39 obtuvo una sensibilidad de 92 por ciento y una especificidad de 100 por ciento, valor predictivo positivo de 100 por ciento y valor predictivo negativo 92,6 por ciento, así mismo, no se observaron reacciones cruzadas con sueros de otras patologías. Al lograr estandarizar y evaluar el antígeno rK39 empleando ELISA, se concluye que es sensible y específico para el serodiagnóstico de la LV. Al incorporarlo en el protocolo de diagnóstico del Laboratorio de Leishmaniasis del Departamento de Parasitología contribuirá a mejor el diagnóstico de esta parasitosis, beneficiando así a pacientes del Estado, Carabobo y su área de influencia
Subject(s)
Humans , Antigens , Leishmaniasis, Visceral/diagnosis , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Serologic Tests , Parasitology , VenezuelaABSTRACT
La leishmaniasis visceral (LV) es una protozoosis humana caracaterizada clínicamente por síndrome febril prolongado hepatoesplenomegalia, anemia y pérdida progresiva de peso. En América afecta principalmente a niños de 5 años pudiendo causar la muerte, por lo cual es necesario contar con procedimientos confiables para el diagnóstico precoz. Entre 1989 y 2003, el laboratorio de Leishmaniasis del Departamento de Parasitología (FCS-UC) Valencia, ha abordado el diagnóstico de LV, en pacientes sospechosos. El protocolo disgnóstico consideró los criterios: epidemiológico, clínico, serológico (ELISA) y demostración directa del parásito, por extendido de médula ósea (MO) coloreado con Giemsa e inoculación de MO en hámster. Se consideró como caso LV a todo paciente con diagnóstico parasitológico positivo o tener al menos 3 de los otros criterios. De los 118 evaluados, 23 cumplieron los criterios disgnósticos para LV. El método de ELISA detectó 95,7 por ciento, extendido de MO 91,3 por ciento e inoculación en hámster 70 por ciento. El 78,3 por ciento procedieron de áreas endémicas conocidas de LV; 43,5 por ciento en menores de 10 años. El número de casos por año presentó un patrón hipoendémico, no cíclico. El presente estudio ratifica la importancia de la integración de criterios para garantizar un diagnóstico eficaz precoz, con el fin de iniciar tratamiento y evitar complicaciones. Además contribuye a documentar la morbilidad e importancia de LV en el país
Subject(s)
Fever/parasitology , Infections , Leishmaniasis, Visceral/diagnosis , Parasitology , VenezuelaABSTRACT
La Tripanosomiasis americana o Mal de Chagas es una protozoosis considerada por la OMS un problema de Salud Pública en Latinoamérica. En Venezuela, una de las áreas endémicas de mayor importancia, ha sido las del Estado Carabobo. En este se encuentra El sector Las Cuevas la cual es una comunidad ubicada en el Municipio Autónomo Libertador, que reúne características ecológicas, ambientales y culturales que favorecen la transmisión de esta infección, por lo que nos propusimos estudiar la seroprevalencia y aspectos epidemilógicos asociados a la Tripanosomiasis americana en esta comunidad mediante encuesta epidemiológica y detección de anticuerpos anti Trypanosoma cruzi, por dos métodos serológicos Inmunoensayoenzimático: (ELISA) y Hemoaglutinación Indirecta: (HAI). Se consideraron positivos aquellos cuyos resultados positivos coincidieron en ambas pruebas. Se evaluó el 95 por ciento de las viviendas (38/40), de las cuales el 68 por ciento (26/38) presentaban características de rancho, 79 por ciento (30/38) con paredes de bahareque y un 57,9 por ciento (22/38) con techo de palma. En el 79 por ciento (30/38) de las viviendas sus habitantes refirieron haber observado triatominos en su interior y en el 37 por ciento (14/38) de estas existen abrigos peridomiciliarios aptos para el vector. Se evaluó serológicamente el 74 por ciento (108/146) del total de la población, de los cuales el 49 por ciento (53/108) eran menores de 18 años, 45 por ciento (49/108) masculinos y 54,6 por ciento (59/108) femeninos. Se obtuvo una seroprevalencia de 12 por ciento (13/108), con un 95 por ciento de concordancia entre ambas pruebas. El 100 por ciento de los seropositivos eran mayores de 44 años, y habitaban en ranchos con paredes de bahareques, 53 por ciento (71/13) con techos de palma y 46,2 por ciento (6/13) con techos de zinc